二条齐敬在文化十三年（1816年）出生，是父母二条齐信及德川从子（水户藩主・德川治纪之女，齐昭之姊）的次子，也是德川庆喜的从兄弟。文政七年（1824年）5月元服，依二条家惯例接受将军德川家齐的偏讳，命名为齐敬，9岁时叙从五位下。文政八年（1825年）升从三位，以后依顺升进，到天保二年（1831年）就任权大纳言。

黑船来航以后，他与德川齐昭持相同意见，认为不应该签署日美友好通商条约。安政五年（1858年）当大老井伊直弼主导时，将军德川家定听顺井伊直弼决定，立纪州藩主德川庆福（家茂）为第14代将军，他被下调为将军宣下使者，当时他希望与井伊直弼会面但被拒绝。同年受安政大狱处罚，翌年2月需要慎十日，次月升进内大臣。文久二年（1862年）再进右大臣。